Introducción a los medios de cultivo microbianos comunes (I)
El medio de cultivo es un tipo de matriz de nutrientes mixtos preparada artificialmente a partir de varias sustancias de acuerdo con las necesidades de varios crecimientos microbianos, que se utiliza para cultivar o separar varios microorganismos.Por lo tanto, la matriz de nutrientes debe contener nutrientes (incluyendo fuente de carbono, fuente de nitrógeno, energía, sal inorgánica, factores de crecimiento) y agua que puedan ser utilizados por los microorganismos.Según el tipo de microorganismos y el propósito del experimento, existen diferentes tipos y métodos de preparación de medios de cultivo.
Algunos medios de cultivo comunes en el experimento se introducen de la siguiente manera:
Medio de agar nutricional:
El medio de agar nutritivo se utiliza para la propagación y el cultivo de bacterias comunes, para la determinación del recuento bacteriano total, la conservación de especies bacterianas y el cultivo puro.Los ingredientes principales son: extracto de carne, extracto de levadura, peptona, cloruro de sodio, polvo de agar, agua destilada.La peptona y el polvo de res proporcionan fuentes de nitrógeno, vitaminas, aminoácidos y carbono, el cloruro de sodio puede mantener una presión osmótica equilibrada y el agar es el coagulante del medio de cultivo.
El agar nutricional es el tipo más básico de medio de cultivo, que contiene la mayoría de los nutrientes necesarios para el crecimiento microbiano.El agar nutricional se puede utilizar para el cultivo bacteriano de rutina.
Medio de agar sangre:
El medio de agar sangre es un tipo de medio de peptona de extracto de carne que contiene sangre animal desfibrinada (generalmente sangre de conejo o sangre de oveja).Por lo tanto, además de varios nutrientes necesarios para el cultivo de bacterias, también puede proporcionar coenzimas (como el factor V), hemo (factor X) y otros factores de crecimiento especiales.Por lo tanto, el medio de cultivo de sangre se usa a menudo para cultivar, aislar y conservar ciertos microorganismos patógenos que son exigentes para la nutrición.
Además, el agar sangre generalmente se usa para la prueba de hemólisis.Durante el proceso de crecimiento, algunas bacterias pueden producir hemolisina para romper y disolver los glóbulos rojos.Cuando crecen en la placa de sangre, se pueden observar anillos hemolíticos transparentes o translúcidos alrededor de la colonia.La patogenicidad de muchas bacterias está relacionada con las características hemolíticas.Debido a que la hemolisina producida por diferentes bacterias es diferente, la capacidad hemolítica también es diferente y el fenómeno de hemólisis en la placa de sangre también es diferente.Por lo tanto, la prueba de hemólisis se usa a menudo para identificar bacterias.
Medio TCBS:
TCBS es un medio de agar sacarosa con sal biliar y citrato de tiosulfato.Para el aislamiento selectivo de vibrio patógeno.La peptona y el extracto de levadura se utilizan como nutrientes básicos en el medio de cultivo para proporcionar una fuente de nitrógeno, una fuente de carbono, vitaminas y otros factores de crecimiento necesarios para el crecimiento de bacterias;La mayor concentración de cloruro de sodio puede satisfacer las necesidades del crecimiento halófilo de vibrio;sacarosa como fuente de carbono fermentable;El citrato de sodio, el ambiente alcalino de pH alto y el tiosulfato de sodio inhiben el crecimiento de bacterias intestinales.El polvo de bilis de vaca y el tiosulfato de sodio inhiben principalmente el crecimiento de bacterias grampositivas.Además, el tiosulfato de sodio también proporciona una fuente de azufre.En presencia de citrato férrico, las bacterias pueden detectar el sulfuro de hidrógeno.Si hay bacterias productoras de sulfuro de hidrógeno, se generará un sedimento negro en la placa;Los indicadores del medio TCBS son el azul de bromocresol y el azul de timol, que son indicadores ácido base.El azul de bromocresol es un indicador ácido-base con un rango de cambio de pH de 3,8 (amarillo) a 5,4 (azul-verde).Hay dos rangos de decoloración: (1) el rango ácido es pH 1.2~2.8, cambiando de amarillo a rojo;(2) El rango alcalino es de pH 8.0~9.6, cambiando de amarillo a azul.
Medio de agar peptona de soja con queso TSA:
La composición de TSA es similar a la del agar nutritivo.En el estándar nacional, generalmente se usa para probar la sedimentación de bacterias en salas limpias (áreas) de la industria farmacéutica.Seleccione el punto de prueba en el área a probar, abra la placa TSA y colóquela en el punto de prueba.Las muestras se tomarán cuando se expongan al aire durante más de 30 minutos en diferentes momentos y luego se cultivarán para el recuento de colonias.Diferentes niveles de limpieza requieren diferentes recuentos de colonias.
Agar Mueller Hinton:
El medio MH es un medio microbiano utilizado para detectar la resistencia de los microorganismos a los antibióticos.Es un medio no selectivo en el que pueden crecer la mayoría de los microorganismos.Además, el almidón de los ingredientes puede absorber las toxinas liberadas por las bacterias, por lo que no afectará los resultados de la operación con antibióticos.La composición del medio MH es relativamente suelta, lo que favorece la difusión de antibióticos, por lo que puede mostrar una zona de inhibición del crecimiento evidente.En la industria de la salud de China, el medio MH también se usa para la prueba de sensibilidad a las drogas.Cuando se realizan pruebas de sensibilidad a fármacos para algunas bacterias especiales, como Streptococcus pneumoniae, se puede agregar al medio un 5 % de sangre de carnero y NAD para cumplir con los diferentes requisitos nutricionales.
Agar SS:
El agar SS generalmente se usa para el aislamiento selectivo y el cultivo de Salmonella y Shigella.Inhibe las bacterias grampositivas, la mayoría de coliformes y proteus, pero no afecta el crecimiento de salmonella;El tiosulfato de sodio y el citrato férrico se utilizan para detectar la generación de sulfuro de hidrógeno, lo que hace que el centro de la colonia se vuelva negro;El rojo neutro es el indicador de pH.La colonia productora de ácido del azúcar fermentado es roja, y la colonia del azúcar no fermentado es incolora.Salmonella es una colonia incolora y transparente con o sin centro negro, y Shigella es una colonia incolora y transparente.
Hora de publicación: 04-ene-2023