Un tubo de centrífuga es un tubo simple que puede soportar altas velocidades de rotación y presión, como separar algunas muestras y separar sedimentos sobrenadantes.El tubo de centrífuga de ultrafiltración tiene dos partes similares al tubo interior y al tubo exterior.El tubo interior es una membrana con un determinado peso molecular.Durante la centrifugación a alta velocidad, aquellos con un peso molecular más pequeño se filtrarán al tubo inferior (es decir, el tubo exterior), y aquellos con un peso molecular mayor quedarán atrapados en el tubo superior (es decir, el tubo interior).Este es el principio de la ultrafiltración y se utiliza a menudo para concentrar muestras.
Los tubos de centrífuga de ultrafiltración generalmente se pueden usar sin tratamiento previo, pero para el procesamiento de muestras de proteínas, especialmente para soluciones de proteínas diluidas (< 10 ug/ml), la tasa de recuperación de la concentración con membranas de ultrafiltración a menudo no es cuantitativa.Aunque los materiales PES minimizan la adsorción inespecífica, algunas proteínas, especialmente cuando están diluidas, pueden tener problemas.El grado de unión inespecífica varía según la estructura de las proteínas individuales.Las proteínas que contienen dominios cargados o hidrofóbicos tienen más probabilidades de unirse irreversiblemente a diferentes superficies.El pretratamiento de pasivación en la superficie del tubo de centrífuga de ultrafiltración puede reducir la pérdida de adsorción de proteínas en la superficie de la membrana.En la mayoría de los casos, el pretratamiento de la columna antes de concentrar la solución de proteína diluida puede mejorar la tasa de recuperación, porque la solución puede llenar los sitios de adsorción de proteína en blanco expuestos en la membrana y la superficie.El método de pasivación consiste en remojar previamente la columna con un volumen mayor de solución de pasivación durante más de 1 hora, lavar bien la columna con agua destilada y luego centrifugarla una vez con agua destilada para eliminar completamente la solución de pasivación que pueda quedar en la película. .Tenga cuidado de no dejar que la película se seque después de la pasivación.Si desea utilizarlo más tarde, deberá agregar agua destilada esterilizada para mantener la película húmeda.
Los tubos de centrífuga de ultrafiltración normalmente no se pueden esterilizar ni reutilizar.Dado que el precio de un solo tubo no es barato, muchas personas intentan reutilizarlo; la experiencia consiste en limpiar la superficie de la membrana con agua destilada muchas veces y centrifugarla una o dos veces.El tubo pequeño que se puede centrifugar al revés se puede sumergir en agua destilada y luego centrifugar al revés más veces, lo que será mejor.Puede usarse para la misma muestra repetidamente y puede remojarse en agua destilada cuando no esté en uso, pero se debe evitar la contaminación bacteriana.No mezcle diferentes muestras.Algunas personas dicen que remojar en alcohol al 20% y NaOH (hidróxido de sodio) 1 n puede prevenir el crecimiento de bacterias y evitar la sequedad.Mientras la membrana de ultrafiltración invada el agua, no se puede permitir que se seque.Sin embargo, otros dicen que destruirá la estructura de la membrana.En cualquier caso, los fabricantes generalmente no apoyan la reutilización.El uso repetido bloqueará el tamaño de los poros de la membrana del filtro e incluso provocará fugas de líquido, lo que afectará los resultados experimentales.
Hora de publicación: 05-sep-2022