Varias enzimas comúnmente utilizadas en experimentos de PCR.

Reacción en cadena de la polimerasa, abreviada comoPCRen inglés, es una técnica de biología molecular utilizada para amplificar fragmentos específicos de ADN.Puede considerarse como una replicación especial del ADN fuera del cuerpo, que puede aumentar considerablemente una cantidad muy pequeña de ADN.Durante todo elPCREn el proceso de reacción, una clase de sustancias desempeña un papel vital: las enzimas.

1. ADN Taq

En experimentos realizados en los primeros días dePCR, los científicos utilizaron ADN polimerasa I de Escherichia coli, pero hay un problema con esta enzima: necesita reponer nueva enzima cada vez que se realiza un ciclo, lo que complica un poco los pasos de la operación y es difícil de amplificar de forma totalmente automática.Este problema se resolvió después de que los científicos aislaron accidentalmente la ADN polimerasa Taq de Thermus Aquaticus en 1988. Desde entonces, la amplificación automática de ADN se ha convertido en una realidad.El descubrimiento de esta enzima también hacePCRtecnología una tecnología conveniente, práctica y universal.Actualmente, la ADN polimerasa Taq es la polimerasa más común en los kits de ADN.

2. ADNPfu

Como se mencionó anteriormente, la Taq DNase tiene un gran error, por lo que los científicos han modificado la Taq DNA polimerasa hasta cierto punto para evitar una amplificación no específica debido a una falta de coincidencia, lo que da como resultado resultados de prueba inexactos.Pero la modificación de la ADN polimerasa Taq puede inhibir la actividad de la ADN polimerasa a temperatura ambiente.La PfuDNA polimerasa puede compensar las desventajas anteriores de la Taq DNA polimerasa, de modo que la reacción de PCR se puede llevar a cabo normalmente y la tasa de éxito de la amplificación del gen objetivo se puede mejorar de manera efectiva.

3. Transcriptasa inversa

La transcriptasa inversa fue descubierta en 1970. Esta enzima utiliza ARN como plantilla, dNTP como sustrato, sigue el principio de emparejamiento de bases y sintetiza una hebra única de ADN complementaria a la plantilla de ARN en la dirección 5′-3′.La transcriptasa inversa depende principalmente de la actividad de la ADN polimerasa de las plantillas de ADN o ARN y, por lo tanto, no tiene actividad exonucleasa 3'-5'.Sin embargo, tiene actividad RNasa H, lo que limita hasta cierto punto la duración de la síntesis de la transcriptasa inversa.Debido a la baja fidelidad y termoestabilidad de la transcriptasa inversa salvaje, los científicos también la modificaron.

ParaPCRPara experimentos, los principales consumibles son: tubo de PCR individual, tubo de PCR de 4/8 tiras y placas de PCR.

LabiosConsumibles para PCRtener lo siguienteventajas:

placas de PCR: Amplia compatibilidad con termocicladores;Alto contraste, fácil identificación del pozo;Bien reflejo de fluorescencia; buenotransferencia de calor;Certificados de DNasa, RNasa, ADN, inhibidores de PCR y probados como libres de pirógenos.

Tubos de PCR individuales: Resistente a la evaporación; buenotransferencia de calor;excelente claridad óptica; DNasa, RNasa, ADN, inhibidores de PCR certificados y probado como libre de pirógenos.

Tubos PCR de 4/8 tiras: Paredes ultrafinas; alta claridad; buen reflejo de fluorescencia;se puede utilizar en la industria farmacéutica, la industria alimentaria y la biología molecular; material de PP virgen de alta calidad; inhibidores de DNasa, RNasa, ADN, PCR certificados y sin pirógenos probados.