Pasos específicos del cultivo celular.

1. Equipo común

1. Equipo en sala de preparación

Destilador simple de agua destilada, destilador doble de agua destilada, tanque de ácido, horno, olla a presión, gabinete de almacenamiento (almacenamiento de artículos no esterilizados), gabinete de almacenamiento (almacenamiento de artículos esterilizados), mesa de empaque.Equipos en la sala de preparación de soluciones: balanza de torsión y balanza electrónica (que pesa medicamentos), medidor de PH (que mide el valor de PH de la solución de cultivo), agitador magnético (configura la sala de soluciones para agitar la solución).

2. Equipamiento de la sala de cultivo

Tanque de nitrógeno líquido, gabinete de almacenamiento (almacenamiento de artículos diversos), lámpara fluorescente y lámpara ultravioleta, sistema purificador de aire, refrigerador de baja temperatura (-80 ℃), aire acondicionado, cilindro de dióxido de carbono, mesa auxiliar (registros de pruebas de escritura).

3. Equipo que debe colocarse en la sala estéril.

Centrífuga (recolección de células), mesa de trabajo ultralimpia, microscopio invertido, incubadora de CO2 (cultivo de incubación), baño de agua, máquina de desinfección y esterilización de tres oxígenos, refrigerador a 4 ℃ (colocación de suero y solución de cultivo).

2 、 Operación aséptica

(1) Esterilización de la sala estéril

1. Limpie la sala estéril con regularidad: una vez a la semana, primero use agua del grifo para trapear el piso, limpie la mesa y limpie la mesa de trabajo, y luego use 3 ‰ de lisol o bromogeramina o ácido peracético al 0,5% para limpiar.

2. Esterilización de la incubadora de CO2 (incubadora): primero limpie con 3 ‰ de bromogeramina, luego limpie con alcohol al 75% o ácido peracético al 0,5% y luego irradie con una lámpara ultravioleta.

3. Esterilización antes del experimento: encienda la lámpara ultravioleta, el esterilizador de tres oxígenos y el sistema purificador de aire durante 20 a 30 minutos respectivamente.

4. Esterilización después del experimento: limpie la mesa ultralimpia, la mesa auxiliar y la platina del microscopio invertido con alcohol al 75% (3 ‰ de bromogeramina).

Preparación para la esterilización del personal de laboratorio.

1. Lávese las manos con jabón.

2. Llevar ropa de aislamiento, gorros de aislamiento, mascarillas y zapatillas.

3. Límpiese las manos con un algodón con alcohol al 75%.

Demostración de funcionamiento estéril.

1. Todas las botellas de alcohol, PBS, medio de cultivo y tripsina que se lleven a la mesa de trabajo ultralimpia deben limpiarse con alcohol al 75 % en la superficie exterior de la botella.

2. Opere cerca de la llama de la lámpara de alcohol.

3. Los utensilios deben esterilizarse antes de su uso.

4. Los utensilios (como tapas de botellas y goteros) que se sigan utilizando deben colocarse en un lugar alto y aún así deben sobrecalentarse durante su uso.

5. Todas las operaciones deben realizarse cerca de la lámpara de alcohol, la acción debe ser ligera y precisa y no debe tocarse al azar.Si la pajita no puede tocar el tanque de líquido residual.

6. Cuando aspire más de dos tipos de líquido, preste atención a reemplazar el tubo de succión para evitar la contaminación cruzada.

Consulte el siguiente capítulo para la desinfección de instrumentos.